martes, 11 de junio de 2013

TERAPIA GÉNICA EN EL DENGUE

Se ha identificado una molécula microARN en las hembras del Aedes aegypti que cuando se desactiva interrumpe la digestión de la sangre y el desarrollo de huevos en el mosquito, un descubrimiento que podría ayudar a controlar la propagación del dengue.
Estas microARN denominadas Mir-275 desempeñan funciones reguladoras del desarrollo y el crecimiento celular, implicadas en las funciones de las hembras del mosquito como la alimentación a partir de la sangre y la maduración de los huevos, necesarias para la reproducción y también para la capacidad del mosquito para transmitir enfermedades. Los investigadores idearon un método para la desactivación específica de la miR-275 en esas hembras y alimentaron a estos mosquitos con sangre, al analizar qué ocurría cuando las hembras no tuviesen ya esta microARN, descubrieron que la sangre permanecía sin digerir en sus intestinos, el volumen total de la sangre consumida era inusualmente grande, lo que indicaba que la función excretora del fluido de los mosquitos había sido impedida y que el desarrollo de los huevos estaba inhibido.

    

Para saber mas de la terapia génica ver en: http://es.wikipedia.org/wiki/Terapia_g%C3%A9nica

Terapia génica

domingo, 9 de junio de 2013

TRANSGÉNICOS EN EL DENGUE

Los mosquitos transgénicos (genéticamente modificados) liberados en los experimentos son mosquitos de la especie Aedes aegypti que transmiten la enfermedad tropical del dengue

Se han conducido dos ensayos de eliminación utilizando la técnica TIE con mosquitos Aedes aegypti. Estos ensayos se realizaron en un pueblo aislado de Kenia, utilizando los machos semi-estériles cuya fertilidad era del 37%. En el primer experimento se liberaron aproximadamente 10 mosquitos estériles por cada mosquito silvestre, pero tuvo un bajo efecto en la población y fue menos efectivo que retirar las larvas de los contenedores domésticos de agua en un pueblo vecino. Un segundo experimento se condujo en la misma localidad con resultados similares. Dos marcadores genéticos que contenían los machos liberados y que no existían naturalmente en la región  continuaban apareciendo en la población durante el periodo de observación; es decir casi un año después de haber terminado los experimentos.

quieres saber mas acerca de los transgénicos ingresa aquí: http://www.rapaluruguay.org/transgenicos/Uruguay/Que_son.html

¿Qué es un transgénico?

domingo, 2 de junio de 2013

ADN RECOMBINANTE EN EL DENGUE



Varias estrategias vacunales están siendo evaluadas tanto en estudios preclínicos como en voluntarios, una de estas estrategias consiste en la inmunización con ADN, la cual consiste en la inoculación a un organismo de un ADN plasmídico que lleva un gen que codifica para un determinado antígeno. Este ADN es captado por células del tejido inoculado, donde se expresa el antígeno e induce una respuesta inmune frente a este. Este tipo de inmunización ofrece algunas ventajas como son: el ADN contiene la secuencia codificante de interés y los elementos reguladores esenciales para que se exprese; ocasiona la generación de una fuerte respuesta humoral y celular, contra el antígeno codificado por el plásmido debido a su presentación por vía MHCI y MHCII. Además el ADN plasmídico es estable frente al calor, lo que permitiría la liofilización de potenciales vacunas. Investigadores se propusieron la obtención de clones recombinantes que expresen diferentes proteínas del virus Dengue 2 en un vector de expresión en células eucariotas, los que serán posteriormente evaluados como vacunas de ADN para determinar la respuesta inmune inducida en animales de experimentación.

ver mas en: 

domingo, 26 de mayo de 2013

ADN RECOMBINANTE EN LA NATURALEZA


Es un tipo de ADN  formado por la unión de dos moléculas  de diferente origen. Se distingue entre el ADN recombinante natural, y el ADN recombinante sintético. El primero es el que se genera de manera biológica dentro de los organismos. El ADN se recombina de manera natural mediante procesos como la reproducción sexual, la transformación bacteriana y la infección viral.
Los virus transfieren ADN entre bacterias y entre especies eucariotas, los virus, que son poco más que material genético envuelto en una cubierta con proteínas, transfieren su material genético durante la infección. Dentro de la célula infectada, los genes se replican y dirigen la síntesis de proteínas virales. Los genes replicados y las nuevas proteínas virales se ensamblan dentro de la célula y forman nuevos virus que, a su vez, son liberados para infectar a otras células. Por lo general, un virus determinado solo infecta y se replica en las células de ciertas especies bacterianas, animales o vegetales. Durante muchas infecciones virales, las secuencias del ADN viral se incorpora a uno de los cromosomas de la célula huésped. Este ADN puede permanecer ahí durante días, meses o incluso años. Cuando se producen nuevos virus a partir del ADN incorporado, estos pueden integrar por error genes humanos en el genoma del virus; de este modo se crea un virus recombinante

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http://books.google.com.ec/books?id=uO48-6v7GcoC&pg=PA244&lpg=PA244&dq=adn+recombinante+natural+en+animales&source=bl&ots=vVqAHR1OZy&sig=9Es5OgTCTqM5nGAMMrOTuQ61gpU&hl=es&sa=X&ei=RS6gUPv3FIKQ9QSQwIDYCg&ved=0CCgQ6AEwAg#v=onepage&q=adn%20recombinante%20natural%20en%20animales&f=false
http://www.arrakis.es/~ibrabida/iganimacion4.gif
http://www.arrakis.es/~ibrabida/iganitransf.gif





ADN recombinante




domingo, 19 de mayo de 2013

OTROS TIPOS DE PRUEBAS MOLECULARES PARA DENGUE CLASICO

Varias  nuevas técnicas de diagnóstico molecular se han desarrollado y se ha probado su utilidad para el diagnóstico del dengue


Hibridación del ácido nucleico. Se realiza a partir del RNA extraído del virus del dengue procedente de los sobrenadantes de cultivos celulares o de grupos de mosquitos como Aedes albopictus.

Inhibición de la Hemoaglutinación (IH). Este método ha tenido y tiene utilidad para la detección de anticuerpos contra dengue, siendo de gran valor para estudios seroepidemiológicos y para distinguir infecciones primarias de secundarias.

Fijación de Complemento (FC).  La prueba se basa en el principio que el complemento será consumido durante la reacción antígeno – anticuerpo.


Prueba de Neutralización (PN). Es la prueba serológica más sensible y más específica para la diagnóstico de la infección por el virus del dengue, y se detecta por un período largo. 

ver mas en: 
http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1726-46342005000300009
https://encrypted-tbn2.gstatic.com/images?q=tbn:ANd9GcThyjz2FC66c2-VUXdpdP1hMTHqMAQ2SgmkhoV11AHY6o070ra-


domingo, 12 de mayo de 2013

TÉCNICAS MOLECULARES EN DENGUE CLÁSICO

El ADN genómico de la levadura MP36 fue obtenido a partir de un cultivo de 200 mL de YPD y purificado utilizando el Kit Wizard Genomic ADN Purification System de Promega, que fue utilizado como control negativo en el análisis del patrón de integración del gen de la envoltura de dengue 4. Los ADN de 36 clones recombinantes fueron purificados por el mismo kit antes mencionado. La detección del gen de la envoltura se realizó por el método de hibridación Dot-Blot, utilizando como sonda el propio gen de la envoltura E del virus dengue 4 obtenido previamente por PCR (polymerase chain reaction, siglas en inglés de reacción en cadena de la polimerasa). El chequeo de los distintos ADN se realizó mediante una electroforesis en gel de agarosa horizontales a  una concentración de 0,8 %, utilizando como buffer de corrida TBE (Tris-borato 40 mM, EDTA 2 mM pH 8,0).
La secuenciación del gen obtenido a partir de PCR de una colonia se realizó de forma semiautomática utilizando oligonucleótidos sintetizados en el Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB).

5 GGGAATTCT ATGCGATGCTTAGGAGTAGGA 3 

5 GGGAATTCTTAAAACATCTTGCCAATGGAACT 3

ver mas en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0375-07602005000300002

EPIGENÉTICA EN EL DENGUE CÁSICO

Huésped: 
  • epigenómico: las hembras del mosquito Aedes aegypty se alimentan de sangre de mamíferos lo que ayuda en el desarrollo de sus huevos.
  • post transcripcional: la desactivación del microARN - MIR-275 impide la digestión de la sangre.
Virus: 
  • epigenómico:  al impedir la digestión de sangre de las hembras los huevos no se desarrollan y el virus no tiene oportunidad de desarrollarse correctamente e impide la transmisión e infección a los humanos.

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